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UV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)牛奶中蛋白質(zhì)含量
更新時(shí)間:2017-05-19 點(diǎn)擊次數(shù):3096

 

UV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)牛奶中蛋白質(zhì)含量

 

納氏試劑分光光度法測(cè)定乳與乳制品中蛋白質(zhì)乳及乳制品是人們喜愛(ài)的常用保健食品,蛋白質(zhì)含量的高低是其重要指標(biāo)。蛋白質(zhì)的測(cè)量方法凱氏定氮蒸餾法,樣品消化后需要蒸餾滴定,操作繁雜,勞動(dòng)力大,費(fèi)時(shí)費(fèi)力。納氏試劑分光光度比色法測(cè)定,方法簡(jiǎn)便快捷,靈敏穩(wěn)定。與原方法經(jīng)T檢驗(yàn)比較,無(wú)顯著性差異。

UV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)牛奶中蛋白質(zhì)含量的原理

樣品中蛋白質(zhì)與硫酸和催化劑一同加熱分解,分解的氨與硫酸生產(chǎn)硫酸銨,硫酸銨與納氏試劑在堿性情況下生成黃至棕色化合物,與樣品氮含量成正比。結(jié)果乘以換算系數(shù),從而計(jì)算樣品中蛋白質(zhì)含量。

UV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)牛奶中蛋白質(zhì)含量需用到的試劑

硫酸  分析純  、硫酸鉀分析純、硫酸銅分析純 納氏試劑  溶解17g氯huagong于300ML水中,另溶解35g碘化鉀于100ml水中,將前液緩慢加入后液中至生成紅色沉淀為止,加入600ML200g/l氫氧化鈉溶液和剩余的氯huagong,儲(chǔ)存于深色瓶,靜置數(shù)日,取上清液于另一深色瓶?jī)?nèi)用橡皮塞塞緊,避光保存。硫酸銨標(biāo)準(zhǔn)溶液  精密稱(chēng)取80℃干燥的硫酸銨4.71g溶于0.01mol/l硫酸溶液中并定容至1000ml。此溶液為1.0mg/ml NH3-N.臨用前用0.01mol/l H2SO4稀釋至10.0ug/ml NH3-N.所需用水均為離子交換水或無(wú)銨蒸餾水。

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)牛奶中蛋白質(zhì)含量主要儀器

UV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)

 

UV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)牛奶中蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)方法

UV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)牛奶中蛋白質(zhì)的樣品處理

精密稱(chēng)取0。2~1.0g固體樣品或稱(chēng)取5~10ml液體樣品于250ml定氮瓶中,加入0.2g硫酸銅,3g硫酸鉀及10ml硫酸,搖勻后于瓶口放一小漏斗,傾斜置有小孔的石棉網(wǎng)隔熱的電爐上,先小火加熱,至樣品炭化泡沫停止后,加大火力至液體呈藍(lán)色澄清透明后,繼續(xù)加熱0.5h,取下放冷,小心加水,冷后分次洗入100ml容量瓶定容至刻度,準(zhǔn)確吸取5ml定容后樣品消化液于一100ml容量瓶,用水定容至刻度。即樣品消化液稀釋液備用,同時(shí)做試劑空白。準(zhǔn)確吸取2.0-5.0ml樣品消化稀釋液和等量空白消化液0.00.50、1.00、3.005.007.00、10.00ml分別于50ml納氏比色管內(nèi),用0.01mol/l硫酸定容至刻度混勻,每管分別加入1.00ml納氏試劑,混勻,10min420nm波長(zhǎng),1.0CM比色皿蒸餾水校正零點(diǎn)比色,繪制回歸標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

計(jì)算樣品測(cè)定液和空白測(cè)定液中氮的含量

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方法與討論

方法的線(xiàn)性范圍,相關(guān)系數(shù)

氮含量在0.1-2.0ug/ml范圍內(nèi)線(xiàn)性良好,相關(guān)系數(shù)R=0.9993.

精密度試驗(yàn)取2份奶粉各分別測(cè)定6次結(jié)果見(jiàn)表1。

 

回收率和精密度

向氨基酸口服液中加入標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行回收率試驗(yàn),并進(jìn)行10次平行試驗(yàn)計(jì)算平均回收率和精密度?;厥章屎途芏染喈?dāng)好。

方法應(yīng)用

應(yīng)用本方法測(cè)定了多份口服液、氨基酸沖劑、飼料等,方法重現(xiàn)性、回收率均令人滿(mǎn)意。

結(jié)語(yǔ)

不經(jīng)衍生直接測(cè)定樣品中游離氨基酸,分析速度快,靈敏度高,定性和定量準(zhǔn)確,適合各種樣品中游離氨基酸的測(cè)定。

UV1901PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)法測(cè)定乳及乳制品中的蛋白質(zhì)含量,消耗試劑少,試劑成本低、降低勞動(dòng)強(qiáng)度,能滿(mǎn)足基層工作需要、簡(jiǎn)便、快速、靈敏、不失為一種好方法。

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