紫外可見(jiàn)光譜儀/分光光度計(jì)的原理
分光光度計(jì)是利用物質(zhì)對(duì)光的選擇吸收或發(fā)射的現(xiàn)象,通過(guò)測(cè)量不同波長(zhǎng)的光能量變化而對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的儀器。
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的理論依據(jù)是建立在光的吸收定律上的。
光的吸收定律又稱(chēng)朗伯-比爾定律,是由1768年朗伯提出的光的吸收與介質(zhì)厚度之間的關(guān)系和1852年比爾提出的光的吸收與吸收介質(zhì)濃度之間的關(guān)系合并而成的。
它的數(shù)學(xué)式是A=KCL
其中A:吸光度 K:吸光系數(shù) C:濃度 L:介質(zhì)厚度
當(dāng)入射光強(qiáng)度一定時(shí),介質(zhì)的吸光度與介質(zhì)中吸光物質(zhì)和介質(zhì)濃度的乘積成正比——定量功能的依據(jù)
由于吸光物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收是其自身的物理性質(zhì),經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的實(shí)驗(yàn)摸索,我們知道了大多數(shù)物質(zhì)吸收峰的波長(zhǎng)點(diǎn),那再根據(jù)在某一波長(zhǎng)點(diǎn)有吸收峰,可以反推導(dǎo)出吸光物質(zhì)的性質(zhì)——定性功能的依據(jù)(半定性)
紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)引用新型技術(shù),其功能強(qiáng)大,采用單色器技術(shù),波長(zhǎng)范圍190-1100nm,是各種涉及水和廢水分析領(lǐng)域的通用儀器,應(yīng)用范圍包括市政和工業(yè)廢水,飲用水,加工過(guò)程用水,地表水,冷卻水和鍋爐補(bǔ)給水等。
分子的紫外可見(jiàn)吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見(jiàn)輻射光后,發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。
在水和廢水監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用,對(duì)于一個(gè)水系的監(jiān)測(cè)分析和綜合評(píng)價(jià),一般包括水相(溶液本身)、固相(懸浮物、底質(zhì))、生物相(水生生物)。在水質(zhì)的常規(guī)監(jiān)測(cè)中,紫外可見(jiàn)分光光度法占有較大的比重。由于水和廢水的成分復(fù)雜多變,待測(cè)物的濃度和干擾物的濃度差別很大,在具體分析時(shí)必須選擇好分析方法。
紫外可見(jiàn)光譜法的應(yīng)用具有用樣品量少,結(jié)構(gòu)信息豐富的特點(diǎn),因此得到廣泛的應(yīng)用。同時(shí),紫外可見(jiàn)光譜在理論,儀器,方法和應(yīng)用等方面都取得了進(jìn)步。紫外可見(jiàn)光譜的應(yīng)用大大縮短了復(fù)雜化合物結(jié)構(gòu)測(cè)定的時(shí)間,也是許多過(guò)去難以解決的問(wèn)題迎刃而解,促進(jìn)了學(xué)科的發(fā)展。
近年來(lái),隨著生物科學(xué)研究的發(fā)展,用波譜技術(shù)在分子水平上研究生命過(guò)程的分子運(yùn)動(dòng)和變化規(guī)律成為前沿領(lǐng)域的熱門(mén)話題,波譜法測(cè)定生物分子的技術(shù)也得到快速的發(fā)展。紫外可見(jiàn)光譜具有光明的應(yīng)用前景,相信隨著紫外可見(jiàn)光譜的應(yīng)用技術(shù)的加深,必將在眾多領(lǐng)域改變我們的生活,帶來(lái)巨大的利益。
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